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學(xué)做(zuò)實驗的方(fāng)法(fǎ)初步入(rù)門(mén)-迷你(nǐ)離心(xīn)機技(jì)術(shù)文(wén)章
實驗(yàn)方法:學做(zuò)實(shí)驗兩者方(fāng)法有所不同,大概分為兩種方法:向別人學習和(hé)自學。下(xià)麵分別(bié)介(jiè)紹一下(xià)吧(bā)
基(jī)本(běn)操(cāo)作(zuò)和基(jī)礎知識(shí)
在開(kāi)始學(xué)做實驗的(dí)時候(hòu),有(yǒu)人(rén)指導。做實驗(yàn)的(dí)內(nèi)容,大概(gài)分為(wéi)基本操(cāo)作和具(jù)體實驗的(dí)操作(zuò)。基本(běn)操(cāo)作是具(jù)體實驗(yàn)的(dí)基礎,例如:怎(zěn)樣量取(qǔ)容(róng)積,怎(zěn)樣測(cè)量和調節PH值,怎樣清洗實驗(yàn)室器皿(mǐn),無(wú)菌操作技(jì)術(shù),怎(zěn)樣使(shǐ)用pipette,怎樣配置溶(róng)液(yè),怎(zěn)樣(yàng)autoclave(高(gāo)壓(yā)蒸汽(qì)滅菌)等(děng)。學(xué)做實驗的時候,應(yīng)該先(xiān)學zui基本(běn)的操作,再學(xué)具(jù)體(tǐ)的實驗。這些基本操作具有至(zhì)關重要(yào)的作(zuò)用(yòng),它(tā)直接決(jué)定(dìng)了(liǎo)實(shí)驗(yàn)的(dí)成功(gōng)率。
可以推薦(jiàn)幾本(běn)基(jī)本(běn)關(guān)於實驗操(cāo)作的書。*本書(shū)是《分子生(shēng)物(wù)學(xué)實驗(yàn)室(shì)工作手冊》(英文(wén)名(míng)At the bench: a laboratory navigator)。這本書是生(shēng)物醫學研究生(shēng)的入門書籍,建議(yì)精(jīng)讀三(sān)遍以(yǐ)上。本書中(zhōng)譯本(běn)大(dà)約300多頁(yè),相(xiāng)對(duì)於將(jiāng)要(yào)介(jiè)紹(shào)的其(qí)它(tā)幾本書(shū)籍要薄(báo)很(hěn)多(duō)。它介紹了(liǎo)怎樣在(zài)實驗(yàn)室(shì)與他人(rén)相處,怎樣(yàng)建(jiàn)立(lì)實驗室,怎樣(yàng)寫(xiě)實驗記(jì)錄(lù),實驗(yàn)室(shì)的基本(běn)操(cāo)作如(rú)試劑(jì)的配置,儲(chǔ)藏(cáng)和處理(lǐ),無(wú)菌(jūn)技術,細(xì)胞(bāo)培(péi)養,離心(xīn),測PH值(zhí),電(diàn)泳,顯(xiǎn)微(wēi)鏡的使用(yòng)等。總(zǒng)而言(yán)之,本(běn)書(shū)基(jī)本上囊括了生物醫學(xué)實驗(yàn)室(shì)日(rì)常遇到(dào)的(dí)問(wèn)題(tí)和所(suǒ)有的基本(běn)操作,是(shì)生物(wù)醫學(xué)研(yán)究(jiū)生的(dí)入門書(shū)籍(jí)。
第二本書是《分子(zǐ)克(kè)隆(lóng)》(英文名Molecular cloning: a laboratory manual),本書(shū)被(bèi)譽(yù)為分子生(shēng)物(wù)學的(dí)聖(shèng)經(jīng),幾乎每(měi)一個(gè)生(shēng)物(wù)實(shí)驗室都有(yǒu)一本(běn)。本(běn)書介紹了分子生(shēng)物學常用(yòng)實(shí)驗(yàn)技術的(dí)基本原(yuán)理和(hé)許多protocol。目(mù)前已經出(chū)版到(dào)第三版(bǎn)。*版出版於 1982年(nián),第二(èr)版(bǎn)出版於(yú)1989年,第三版出(chū)版(bǎn)於(yú)2001年。書(shū)中提供的protocol很經典(diǎn),但是(shì)有(yǒu)些目前(qián)已經(jīng)改進了(liǎo)。這(zhè)本書(shū)很厚,第(dì)三版(bǎn)英文版有2000多頁(yè),所以(yǐ)幾乎(hū)不(bù)可能也沒有(yǒu)必要精(jīng)讀(dú)所有(yǒu)章(zhāng)節,隻要(yào)閱(yuè)讀自己(jǐ)正(zhèng)在做的(dí)實(shí)驗(yàn)的相(xiāng)關(guān)內容就可以了(liǎo)。
《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》這本書從怎樣量取(qǔ)體積,稱(chēng)取重量,測量PH值(zhí),測量濃(nóng)度(dù)等zui基(jī)本(běn)的(dí)操作(zuò)說起,講(jiǎng)到配置溶液,細(xì)胞(bāo)培(péi)養,PCR,樣本(běn)的準(zhǔn)備(bèi),層(céng)析,電(diàn)泳,印(yìn)跡(jì)實驗,顯微(wēi)鏡,酶(méi)促(cù)反應(PCR等(děng))。這(zhè)本書(shū)共有737頁,講的是每(měi)天做實驗(yàn)都(dū)要遇(yù)到的(dí)問題,詳(xiáng)盡係統(tǒng)卻(què)又(yòu)簡(jiǎn)明(míng)易懂(dǒng)。對於希望學好做(zuò)實(shí)驗的人(rén)而言,本書必(bì)須(xū)仔細(xì)閱讀,對於希望(wàng)成為實驗高手(shǒu)的人而言(yán),本(běn)書更(gēng)應該(gāi)精讀。Current Protocol是Wiley出(chū)版(bǎn)社出版(bǎn)的一(yī)個實驗(yàn)室手冊叢書,是生物醫(yī)學實(shí)驗經典叢(cóng)書之一(yī),目前有16本(běn),包(bāo)括:Neuroscience, Molecular biology, Microbiology, Immunology, Toxicology, Cell biology等。
以(yǐ)上三本(běn)書(shū)各有特點(diǎn)。《At the bench: a laboratory navigator》為(wéi)科(kē)普性質(zhì),是對實(shí)驗室基礎(chǔ)技(jì)術(shù)的粗略介紹,《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》是對實驗(yàn)室基礎(chǔ)技術(shù)的詳(xiáng)細(xì)介紹,而《Molecular Cloning》則是對具(jù)體實驗的詳細介(jiè)紹。按照“柿子先(xiān)撿(jiǎn)軟(ruǎn)的捏”的原則(zé),建(jiàn)議(yì)先通讀《At the bench: a laboratory navigator》,再通(tōng)讀(dú)《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》1,2,3,5,9章及(jí)正(zhèng)在(zài)學習(xí)的具體(tǐ)實驗(yàn)的(dí)相關章節,加上(shàng)閱(yuè)讀《Molecular Cloning》正在學(xué)習(xí)的具(jù)體實(shí)驗(yàn)的相關章(zhāng)節(jié)。通讀的時(shí)候(hòu),標出重(zhòng)點及(jí)自己的(dí)知識盲(máng)點,以後多(duō)復習重點和知識(shí)盲點幾遍直至了(liǎo)然(rán)於胸。
怎樣向別人(rén)學做(zuò)實(shí)驗(yàn)
如果有人教做實驗(yàn),學習效率(shuài)會高很多。無論是向老師還(huán)是向師(shī)兄(xiōng)師(shī)姐(jiě)學習(xí),都需要(yào)注意(yì)別(bié)人(rén)的(dí)時(shí)間是(shì)寶貴的(dí),所以(yǐ)盡可能一兩次學(xué)會。因(yīn)此(cǐ),在(zài)學習(xí)之(zhī)前(qián),先問(wèn)清(qīng)楚需(xū)要學習的(dí)實(shí)驗內容(róng),自己先通過閱讀書籍,查(chá)閱(yuè)網絡資料對該實(shí)驗的原理和基本操作有一個大概的(dí)了解。好(hǎo)記性不(bù)如爛筆(bǐ)頭,在學習的時(shí)候(hòu),要(yào)帶(dài)上紙筆做記錄(lù)。遇(yù)到(dào)不懂的地方(fāng),不(bù)要因為覺得不(bù)禮貌而將疑問(wèn)存(cún)於心中(zhōng),而應(yīng)該詢問(wèn)清楚。實(shí)驗的精髓不是一份(fèn)簡單(dān)的(dí)Protocol,而(ér)是(shì)實驗(yàn)的“心(xīn)法”:關鍵(jiàn)步(bù)驟,注意事項(xiàng),常見(jiàn)問題和解決方法(fǎ)。做任何(hé)一個(gè)實(shí)驗(yàn),必須(xū)清楚關鍵(jiàn)步驟(zhòu),注意(yì)事項,常見問(wèn)題和解(jiě)決(jué)方法。要(yào)清(qīng)楚一(yī)個試劑的作用是什麼(mó),加多或者少加(jiā)會有(yǒu)什(shí)麼(mó)後果;一個步驟的目的(dí)是(shì)什(shí)麼(mó),時(shí)間太長(cháng)或者太(tài)短會(huì)怎樣(yàng)等(děng)。在學習的(dí)時(shí)候,如果(guǒ)沒有(yǒu)教(jiào)這些“心法(fǎ)”,自(zì)己應該主動請教,並記錄下來。
一開(kāi)始(shǐ)學做實(shí)驗的時候,分三步走(zǒu):老(lǎo)師示(shì)範,自己做(zuò)老師(shī)看,自(zì)己獨立(lì)做。認真的態度常(cháng)常(cháng)使別人樂(lè)於(yú)教(jiào)你,如果自(zì)己無所謂,則(zé)別(bié)人(rén)會覺得教你是在浪費(fèi)時間。在開始學做一個(gè)實(shí)驗的時候,及(jí)時,詳細(xì)的實驗記錄(lù)是(shì)非(fēi)常必要(yào)的,如果(guǒ)實(shí)驗(yàn)失(shī)敗,這些記錄(lù)是分析失(shī)敗原(yuán)因的重要(yào)依據。做完實(shí)驗(yàn)之(zhī)後,要總結經(jīng)驗教(jiào)訓,記(jì)錄下來(lái),並(bìng)定期復(fù)習這些(xiē)經驗教訓。總之,學(xué)做(zuò)實(shí)驗,遵(zūn)循的步驟是:1。 預習(xí)。2。觀摩(mó),記錄。3。自(zì)己(jǐ)操(cāo)作。4。總結(jié)和復習。*次實驗(yàn)就成功,常(cháng)常不(bù)是一件好(hǎo)事(shì),因(yīn)為可能僅僅是運氣(qì)好。多次失(shī)敗後(hòu)的成功才是掌握了(liǎo)實(shí)驗的可靠指標(biāo)。好的(dí)實驗室常常有(yǒu)成熟(shú)的Protocol,不(bù)好(hǎo)的實(shí)驗室,Protocol可能(néng)並不*,需要(yào)自己摸索(suǒ)和(hé)調整。
怎(zěn)樣自學(xué)做實(shí)驗(yàn)
不(bù)是每一(yī)個實驗都(dū)有(yǒu)人(rén)教(jiào),需要(yào)自(zì)學(xué)的(dí)情(qíng)況很常見。自(zì)學(xué)做(zuò)實驗,必(bì)須(xū)在掌(zhǎng)握(wò)了實驗(yàn)的(dí)基(jī)本操(cāo)作的(dí)基(jī)礎(chǔ)上(shàng)進行(háng)。自(zì)學實驗,關(guān)鍵(jiàn)是(shì)要(yào)找(zhǎo)到可行的protocol,並(bìng)清楚實驗原理(lǐ),關鍵步驟,常(cháng)見問題和解決(jué)方法。 我一般(bān)采(cǎi)取(qǔ)的程(chéng)序是(shì):首先用搜索引(yǐn)擎(qíng)檢索實驗原理,常見問(wèn)題(tí),注(zhù)意(yì)事(shì)項(xiàng)等(děng)。把(bǎ)網上(shàng)許(xǔ)多(duō)文(wén)章拷貝(bèi)下來,仔細(xì)閱(yuè)讀,找出重點,總(zǒng)結(jié)成簡化版。然(rán)後,找一個(gè)好的protocol。Protocol可(kě)以從檢(jiǎn)索,從書籍中(zhōng)找到,從別人(rén)的文(wén)獻中找(zhǎo),或(huò)者(zhě)從生物公(gōng)司的(dí)上找。這些(xiē)方法下麵(miàn)分(fēn)別(bié)介(jiè)紹。找(zhǎo)到(dào)不同(tóng)的protocol進(jìn)行(háng)比(bǐ)較,分(fēn)析為(wéi)什麼(mó)不同。通(tōng)過(guò)比較,可(kě)以加深(shēn)對(duì)實驗的(dí)理解。
如果(guǒ)係(xì)裏(lǐ)或(huò)者認(rèn)識的人(rén)有正在學習的實驗(yàn)的(dí)專家,向專家請教(jiào),可以節約不少時間。有時候,一(yī)個(gè)小小(xiǎo)的細節問(wèn)題就(jiù)可以浪費許多時(shí)間(jiān)。
