一(yī),根(gēn)據
酶(méi)標(biāo)板振蕩器酶(méi)標板底部(bù)的不同,可(kě)以(yǐ)分(fēn)為(wéi)平(píng)底,U型(xíng)底,V型(xíng)底
平(píng)底(dǐ)的(dí)折射率(shuài)低(dī),適(shì)於在酶標(biāo)儀檢測;U型(xíng)底的(dí)酶(méi)標板折射率(shuài)較高,方(fāng)便(biàn)加(jiā)樣,吸樣(yàng),混(hùn)匀等操(cāo)作,可以不(bù)用放(fàng)在酶(méi)標儀上(shàng),直(zhí)接通過目測觀(guān)察顏(yán)色變化情(qíng)況,從(cóng)而(ér)判定有無相應的免(miǎn)疫反應(yīng)。V底的(dí)酶標(biāo)板可以的(dí)吸取樣(yàng)品。
二(èr),根據(jù)酶標板(bǎn)振蕩(dàng)器與(yǔ)蛋(dàn)白和(hé)其它分子(zǐ)結合(hé)能力(lì)的不同(tóng),分為高(gāo)結(jié)合(hé)力,中(zhōng)結合力和氨(ān)基(jī)化(huà)
高結合力(lì):表麵經(jīng)處(chǔ)理後(hòu),其蛋(dàn)白結合能(néng)力大大(dà)增強(qiáng),可(kě)達(dá)300——400ngIgG/cm2,主(zhǔ)要結合的蛋(dàn)白分(fēn)子(zǐ)量>10kD。使用(yòng)該類酶(méi)標(biāo)板可(kě)提高(gāo)敏感性(xìng),並(bìng)可相對減少包(bāo)被(bèi)蛋(dàn)白的(dí)濃度(dù)和用量,不足之處(chǔ)為較(jiào)易產(chǎn)生(shēng)非特異性反(fǎn)應(yīng)。抗(kàng)原或抗(kàng)體包(bāo)被後,以(yǐ)非離子(zǐ)去汙(wū)劑無法有效(xiào)地封(fēng)閉未結合(hé)蛋白的(dí)部(bù)位(wèi),需使用蛋白作(zuò)為(wéi)封閉(bì)劑。
中結合(hé)力:經(jīng)表麵(miàn)疏水(shuǐ)鍵被動(dòng)與(yǔ)蛋(dàn)白結合,適(shì)合(hé)作(zuò)為分子(zǐ)量>20kD的大分子蛋(dàn)白的固相載(zǎi)體,其蛋白結(jié)合能力(lì)為200——300ng IgG/cm2。由(yóu)於該類(lèi)酶標板所(suǒ)具有(yǒu)的僅(jǐn)與大分子結合的(dí)特(tè)性,適用(yòng)於作(zuò)為未(wèi)純化抗體或(huò)抗(kàng)原的固相(xiāng)載體,可降低潛在的非特(tè)異(yì)性交(jiāo)叉反(fǎn)應(yīng)。該類(lèi)板(bǎn)可以(yǐ)惰(duò)性蛋白或非(fēi)離(lí)子(zǐ)去汙劑(jì)作(zuò)為(wéi)封閉(bì)液。
氨基(jī)化(huà):經(jīng)表麵(miàn)改性處(chǔ)理後擁有(yǒu)帶正電荷的氨(ān)基(jī),其疏水鍵由親水(shuǐ)鍵(jiàn)取代。該類(lèi)酶標板適(shì)合作(zuò)為(wéi)小分(fēn)子(zǐ)蛋(dàn)白(bái)的固相(xiāng)載體(tǐ)。使用合適的緩衝液和(hé)pH值,其(qí)表麵可(kě)通(tōng)過(guò)離子(zǐ)鍵與(yǔ)帶負電荷(hé)的小分(fēn)子(zǐ)結合。由(yóu)於其表(biǎo)麵(miàn)的親(qīn)水特性(xìng)和可通過其它(tā)交(jiāo)聯(lián)劑共價結合(hé)的能(néng)力,可(kě)用(yòng)於固定(dìng)溶於(yú)Triton-100,Tween 20等去汙劑的(dí)蛋白分(fēn)子。該(gāi)類板(bǎn)的(dí)缺陷(xiàn)為由(yóu)於降低了疏水(shuǐ)性(xìng),一部(bù)分(fēn)蛋白(bái)分子無(wú)法(fǎ)結合(hé);此外,其(qí)表(biǎo)麵需有(yǒu)效(xiào)地(dì)封(fēng)閉。由(yóu)於(yú)親(qīn)水和(hé)共價的(dí)表(biǎo)麵(miàn)特(tè)性(xìng),使用的封(fēng)閉液(yè)必(bì)須(xū)能夠(gòu)與非(fēi)反(fǎn)應性氨基基(jī)團和(hé)所(suǒ)選擇(zé)的交(jiāo)聯(lián)劑中(zhōng)任(rèn)何功能基團(tuán)發(fā)生(shēng)作用。
三,
酶(méi)標板振蕩(dàng)器根(gēn)據顏(yán)色分為透明,黑(hēi)色,白(bái)色(sè)
透(tòu)明的(dí)是zui常(cháng)用的(dí),用於(yú)zui一般(bān)的酶聯免疫實(shí)驗(yàn)。相(xiāng)對於透(tòu)明的的板子,還有用於發(fā)光檢測(cè)用的不(bù)透明的(dí)板(bǎn)子(zǐ),一般(bān)有黑(hēi)色和白色(sè)兩(liǎng)種。黑色的酶(méi)標板自身會有(yǒu)光(guāng)吸(xī)收(shōu),所以它的信號(hào)相對(duì)於(yú)白色(sè)的板(bǎn)子(zǐ)要低(dī)很多(duō),因(yīn)此一般(bān)用於(yú)檢(jiǎn)測(cè)較強的光(guāng),如(rú)熒(yíng)光檢(jiǎn)測。而白色(sè)的(dí)酶標板就(jiù)用(yòng)於(yú)較弱(ruò)的光檢測(cè),常用於一般(bān)的(dí)化(huà)學發(fā)光。另(lìng)外黑色的酶標(biāo)板(bǎn)還(huán)可以消(xiāo)弱(ruò)非特異反應帶(dài)來的問(wèn)題。有(yǒu)些客戶會(huì)問,用一(yī)般(bān)的酶(méi)標板可(kě)不可以進行發光(guāng)檢測(cè),回答是不(bù)可以(yǐ)的,因(yīn)為一般從(cóng)化(huà)學發光反應(yīng)中發(fā)射(shè)出的(dí)光(guāng)是各(gè)向同性的,也就是(shì)說各(gè)個(gè)方(fāng)向上(shàng)同(tóng)等發射(shè)出來的。如果(guǒ)用(yòng)透明的板子,光(guāng)不(bù)僅會(huì)從垂(chuí)直方(fāng)向(xiàng)發散,還從(cóng)水平方向發散出來。很(hěn)容(róng)易(yì)的就會通(tōng)過各個孔(kǒng)之(zhī)間的間(jiān)隙和孔壁。這樣的(dí)話,光(guāng)較(jiào)強時(shí)相鄰孔之間(jiān)的影響就(jiù)會很大(dà),因(yīn)此不能用(yòng)透明的(dí)酶(méi)標(biāo)板(bǎn)來進(jìn)行化(huà)學發光實(shí)驗。